Higakiらにより純化されたレニンを抗原とし,Kohlerらの方法に準じて作成したモノクローナル抗体のうち,clone number 12-12をビーズ固相化抗体,69-30をヨウ化レニン抗体として,bound/free分離にビーズ固相法を用いたimmuno-radiometric assay(IRMA)系を用いて研究を行った.実際の測定手技は以下に示すごとくである.

　ヒト腎(ウイルムス腫瘍患児の患側の正常腎組織)の新鮮凍結標本について,抗レニンモノクローナル抗体69-30を用いた免疫組織染色を行った.

　ヒト血漿10検体を用いて,そのまま前述のモノクローナル抗体を用いたレニン測定法(IRMA法)により測定を行うとともに,trypsin処理後にも同様にIRMA法により測定を行った.その双方の測定値を比較することにより,trypsin処理による測定値の変動の有無について検討した.

　正常小児(鼠径ヘルニア患児)並びに腎腫瘍性病変を中心とする各種疾患患児51例89検体を対象として,採取した血漿を2分し,同一血漿について前述のIRMA法によりレニン濃度を測定するとともに,酸処理を併用した酵素法(従来法)によっても測定した.

　鼠径ヘルニア患児を中心とする,レニンアンギオテンシン系について正常と考えられる小児91例について,術前検査の採血の際に家族の同意のもとに血漿約0.5mlを得,そのレニン濃度について前述の固相ビーズサンドイッチ型IBMA法による測定を行い,本法による測定値の正常値について検討した.

　ウイルムス腫瘍14例,CMN2例の腎疾患症例に,神経芽腫16例,奇形腫10例,肝芽腫5例から血漿0.5mlを採取し,前述のIRMA法により,レニン濃度を測定し,臨床検討1の結果に基づき評価した.

　ヒト腎(ウイルムス腫瘍患児の患側の正常腎組織)の新鮮凍結標本について,抗ヒトレニンモノクローナル抗体69-30を用いた免疫組織染色を行ったところ,傍系球体細胞(juxtaglomerular cell)のみが染色された.

　ヒト血漿10検体におけるtrypsin処理前後では,ごく軽度の減少傾向を示したのみであり,活性化にともなう,測定値の著明な上昇が認められなかった.

　同一血漿89検体について,前述のIRMA法による測定値[Y]と酸処理を併用した従来法による測定値[X]との比較では,同一検体における両測定法の値の間には,y＝4.94x+76.37という回帰直線が得られ,また,R＝0.921という高い相関係数が得られた.(p<0.01)

　正常小児91例における,本法による総レニン測定結果について示す.生後12ヶ月までの群では213.7±102.8pg/ml,1-3才では190.5±106.9pg/ml,3-6才では154.9±74.5pg/ml,6才以上では137.7±63.6pg/mlとの結果であり,乳児期に高値を示し,加齢とともに減少する傾向がみられた.それぞれの群でmean+2SDに相当する値,生後12ヶ月まで419.3pg/ml,生後1-3才[13-36m]404.3pg/ml,生後3-6才[37-72m]303.9pg/ml,生後6才以後[73m-]264.9pg/mlをcut-off値として採用し,これにより総レニン濃度について評価を行うこととした.

図表

　ウイルムス腫瘍14例では,本測定法による総レニン濃度は,204pg/mlから1289pg/mlと比較的幅広く分布し,平均値においては,516.6±314.7pg/mlであった.14例中,年令相当のcut-off値より高値を示したものは,9例(64.3%)であった.腫瘍重量が明らかな9例について,総レニン濃度と腫瘍重量との関連について検討したが,腫瘍重量即ち腫瘍の大きさと総レニン濃度との関連は認められないようであった.その組織分類と総レニン濃度との関連については,腎芽型小巣亜型では4/7[57.1%],同大巣亜型では2/3[66.7%],同複合亜型2/2[100%],上皮型では1/1[100%],CPDN 0/1[0%]であり,組織分類と総レニン濃度との関連についても,一定の傾向は認められなかった.さらに、術前、術後にわたり,経時的に測定が行われたウイルムス腫瘍5例については,腫瘍全摘後は,905→93,691→239,511→114,342→69,294→141と全例において著明に低下し,正常範囲内となったことが観察された.一方,最も頻度の高い小児悪性固形腫瘍である神経芽腫16例では,全例cut-off値より低値であり,その平均値も206.4±68.7pg/mlという結果であった.

図表