東京大学医科学研究所において樹立された近交系マウスDDD/1は、リンパ節中のT細胞数が他の系統に比して著しく減少していた(図1)。しかし、末梢血中や脾臓では逆にT細胞数は多く、DDD/1では全T細胞数が減少しているのでははなく、リンパ節へのホーミングに異常を生じている可能性が示唆された。DDD/1とBALB/cマウスとの交配実験の結果から、このT細胞数の異常形質が単一劣性遺伝子により支配されていることが明らかになり、この遺伝子をplt(paucity of lymph node T cells)と命名した。免疫組織化学法によって末梢リンパ節に加えパイエル板及び脾臓について観察したところ、plt/pltマウスでは末梢リンパ節及びパイエル板のT細胞領域と脾臓の白脾髄中のT細胞領域にT細胞がほとんど観察されなかった。次に、T細胞のホーミングを機能的に検討するため、蛍光標識した+/+マウス由来のリンパ球を用いて移入実験を行った。T細胞は+/+マウスの末梢リンパ節及びパイエル板ヘホーミングしたが、plt/pltマウスのこれらの組織へはしなかった(図2)。脾臓ヘホーミングしたT細胞数はむしろplt/pltマウスでの方が多かったが、この脾臓を共焦点レーザー顕微鏡を用いて組織学的に観察したところ、T細胞は赤脾髄に多く観察され、白脾髄にはほとんど観察されなかった。各リンパ組織のB細胞数はplt/pltマウスでも+/+マウスと同程度であり(図1)、移入実験でもplt/pltマウスの二次リンパ組織へ正常にホーミング出来た(図2)。以上の結果から、plt/pltマウスではT細胞特異的に、末梢二次リンパ組織へのホーミング不全が生じていることが明らかになった。移入するT細胞がplt/plt由来の場合でも結果は同様であり、さらに、相互骨髄移植した後のリンパ節中のT細胞含有率が宿主型であったこと等から、plt突然変異による異常はT細胞そのものにではなく、リンパ組織側に生じたものであることが示唆された。

　リンパ節へのリンパ球のホーミングには、リンパ球表面上の接着分子L-selectinとリンパ節内の細静脈高内皮細胞表面上のリガンドPNAd(peripheral node addressin)との結合が必須であることが知られているので、plt/pltマウスのこれらの分子の発現及び機能を調べた。フローサイトメトリーによってL-selectinはT細胞上に正常に発現していることが確認された。免疫組織化学法によって、リガンドである糖鎖PNAdが高内皮細胞上に正常に観察され、さらに、PNAdが付加した蛋白の発現を免疫沈降によって検討したところ、plt/pltマウスでも+/+マウスと同様に各種リガンド蛋白(Sgp200,170kd,CD34及びGlyCAM-1)が確認された。L-selectinとリガンドとの接着能をin vitro binding assayによって検討したところ、plt/pltマウスのリンパ節高内皮細胞は+/+マウスと同様にリンパ球に結合でき、L-selectinリガンドが機能的であることが明らかになった(図3)。

　Simple sequence length polymorphismを用いてplt遺伝子の染色体マッピングを試みた。DDD/1-plt/plt(Mus musculus domesticus)の交配相手として日本野生マウス由来近郊系MSM/Ms(Mus musculus molossinus)を用いた。表現型は末梢リンパ節中のT細胞受容体、L-selectin共陽性細胞の比率(plt/pltマウスでは末梢血中或いは脾臓ではL-selectin陽性細胞の比率は高いが、末梢リンパ節では特徴的に陽性率が低い)及び脾臓のT細胞の分布によって判定した。F1をDDD/1-plt/pltへ戻し交配したマウスについて表現型と各染色体上のマイクロサテライトマーカーの遺伝型を比較したところ、第4染色体上のマーカーのみが有意に連鎖していた(自乗値;D4Mit4:22.00,D4Mit9:6.55)。さらに詳細な染色体地図を作成するため190匹の戻し交配マウスについて検討した結果、pltは第4染色体のセントロメアから約24.7cMの距離でマイクロサテライトD4Mit237と極めて近傍の位置にマップされた(図4)。